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絲裂原活化蛋白激酶MKK7100 ul牛生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒Phospho-MKK7 (Ser271/Thr275) 酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK720 ul牛生長(zhǎng)激素(GH)ELISA試劑盒P53(wt-p53) 腫瘤抑制基因(
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
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產(chǎn)品名稱 | 乙型流感病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家 |
規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | LZP7862 |
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
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實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
(0.105mg/ml)Argonau 2 (C34C6) Rabbit mAb5-羥基吡-2-羧酸甲酯
(10μg/ml,u=6~5%,酮)Argonau 2 (C34C6) Rabbit mAbFmoc-L-賴氨酸鹽酸鹽
敵稗標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.100mg/ml)Bim (C34C5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 700 Conjuga)三氟甲氧基酸
伏殺硫(標(biāo)準(zhǔn)品)CTCF Antibody2-溴-5-基吡啶
伏殺硫標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=7~3%,酮)Phospho-YB1 (Ser102) (C34A2) Rabbit mAb溴異煙酸
克螨特標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.00mg/ml)IQGAP1 (D6E3J) Rabbit mAb氨基二
三殺蟲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)Di-Methyl-Histone H3 (Lys36) (C75H12) Rabbit mAb環(huán)磺酰
三殺蟲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%)Di-Methyl-Histone H3 (Lys36) (C75H12) Rabbit mAb5-(2-氧基)-1-甲基-基-1,6-二氫-7H-吡唑并[4,D]嘧啶-7-酮
霜霉(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%)Phospho-PLCbeta3 (Ser537) (D8K2R) Rabbit mAb兩性霉素 B
多聯(lián)(Aroclor 1248)標(biāo)樣(100μg/mL,基體:甲)ASF1B (C70E2) Rabbit mAb氟-2-酸
多聯(lián)(Aroclor 1221)標(biāo)樣(100.0μg/mL,基體:甲)p70 S6 Kinase Substras Antibody Sampler Kit5-溴-2-甲氧基嘧啶
多聯(lián)(Aroclor 1242)標(biāo)樣(100μg/mL,基體:甲)Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb基胍碳酸鹽
多聯(lián) (Aroclor 1254)標(biāo)樣(100μg/mL,基體:甲)VEGF Receptor 2 Control Proins三酰酮鐵
甲基毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6~4%,酮)IKKε (D20G4) Rabbit mAbN-氨基哌
解毒喹(標(biāo)準(zhǔn)品)IKKε (D20G4) Rabbit mAb羧基酸
綠麥隆標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%)Pim-1 Antibody鹽酸萬(wàn)古霉素
丹溶液(基體:異辛烷)PhosphoPlus®α-Synuclein (Ser129) Antibody Duet硫酸多粘菌素 B
敵草隆(99%)SBI-0206965代二酸二酯
牛甜菜-同型半胱氨酸S-甲基轉(zhuǎn)移酶1(BHMT)ELISA試劑盒Phospho-SEK1/MKK4 (Thr261) 酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4100 ul
牛胎盤生長(zhǎng)因子(PGF)ELISA試劑盒Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257/Thr261) 酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4100 ul
牛羧化不全骨鈣素(ucOC)ELISA試劑盒MEK6 絲裂原活化蛋白激酶MKK6100 ul
牛雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒Phospho-MEK6 (Ser207) 酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK6300 ul
牛瘦素(LEP)ELISA試劑盒Phospho-MEK6 (Ser202) 酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK6100 ul
牛生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA試劑盒MKK7/ERK7 絲裂原活化蛋白激酶MKK7100 ul
牛生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒Phospho-MKK7 (Ser271/Thr275) 酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK720 ul
牛生長(zhǎng)激素(GH)ELISA試劑盒P53(wt-p53) 腫瘤抑制基因(野生型P53)100 ul
牛腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒P53(wt-p53) 腫瘤抑制基因(野生型P53)300 ul
乙型流感病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家無(wú)胸腺癥相關(guān)蛋白DGCR6/迪格奧爾格綜合征關(guān)鍵基因6抗體3β-Hydroxyurs-11-en-28,13β-olide中文名:別名:11,12-Dehydroursolic acid lactone分子式:C30H46O3
朊蛋白DPL抗體Pomolic acid中文名:坡模酸別名:3,19-Dihydroxy-12-ursen-28-oic acid分子式:C30H48O4
肌強(qiáng)直性營(yíng)養(yǎng)不良蛋白激酶抗體Betulin中文名:白樺脂醇別名:20(29)-Lupene-3,28-diol分子式:C30H50O2
神經(jīng)干細(xì)胞樹突調(diào)節(jié)蛋白DAGLα抗體Betulinic acid中文名:白樺脂酸別名:樺木酸; 白樺酸分子式:C30H48O3
雙皮層蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白DCDC2抗體Tereticornate A中文名:別名:分子式:C40H54O6
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。