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斑激酶(FAK)ELISA試劑盒英文名稱:Human focal adhesion kinase,FAK ELISA Kit進口/原裝人鳥氨酸氨基甲酰轉移酶(OCT)ELISA試劑盒英文名稱:Human ornithine carbamoyl transferase,OCT ELISA Kit進口/原裝人鳥氨酸脫羧酶(ODC)ELISA試劑盒英文名稱:Human Ornithine dec
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產品名稱 | 蟹特定基因序列PCR檢測試劑盒價格 |
規格 | 50T |
貨號 | LZP7841 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
四甲基硫酸氫銨(離子色譜級,≥99.0%(T))PAK3 Antibody羥基磺酸鈉
三(LC-MS淋洗劑,≥99.5%(GC))PAK3 Antibody代叔丁烷
四基溴化銨(離子對色譜級)PTMScan® Glutaryl-Lysine [Glut-K] Kit6,6'-二甲基-2,2'-聯吡啶
四丁基化銨(離子對色譜級)PRAS40 Antibody二醋酸酯
三辛(離子對試劑)Phospho-PRK1 (Thr774)/PRK2 (Thr816) Antibody5-甲基異噁唑-酰氨
甲酸鈉(for HPLC,≥99.0%(NT))PRK2 Antibody4,5-二氨基-6-巰基嘧啶
1-己烷磺酸鈉(離子對色譜級,>98.0%(T))HP1β Antibody2-溴酰
高酸鈉,無水(for HPLC,99.0%)Pan-Calcineurin A Antibody氟磺酰基二甲酯
四甲基溴化銨(離子對色譜級,≥99.0%(AT))PAK2 (C17A10) Rabbit mAb三氟
三溴(光譜級,>99.0%(GC))PAK2 (C17A10) Rabbit mAb3,二
草酸鈉容量分析用溶液標準物質(0.05M)HP1α Antibody對甲氧基甲酸酯
氫氧化鈉容量分析用標準溶液(0.0997mol/L)eIF4G (C65H5) Rabbit mAb三羥甲基氨烷馬來酸酯
剛果紅(分析標準品,≥97.0%(HPLC))HP1γ Antibody(2S,5S)-2,5-己二
正癸酸(分析標準品,≥99.5%(GC))Jagged1 (28H8) Rabbit mAb并[B]噻吩-酸
異丁酸(分析標準品,>99.5%(GC))Jagged1 (28H8) Rabbit mAb2-(1H-吡唑-1-基)酸
甲基反亞油酸甲酯(分析標準品)CD161/KLRB1 (HP-3G10) Mouse mAb (PerCP-Cy5.5® Conjuga)N-BOC-L-1,2,3,四氫異喹啉-羧酸
肉豆蔻酸甲酯(分析標準品,≥99.5%(GC))JMJD1B/JHDM2B Antibody2-氨基-5-溴甲酰
三聚(分析標準品,≥99.9%(HPLC))GST Antibody5-溴-2-氟三氟甲
8異(8-iso-PG)ELISA試劑盒NEDD4L/NEDD4-2 泛素連接酶NEDD4-2100 ul
8-異構F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒Phospho-NEDD4L (Ser342) 酸化泛素連接酶NEDD4-2100 ul
8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒NCoR2 核受體輔助抑制因子2100 ul
8-羥基鳥嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)ELISA試劑盒NEP/MME 金屬肽鏈內切酶100 ul
6酮F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒NDRG1/Cap43 分化相關基因NDRG1100 ul
6酮(6-K-PG)ELISA試劑盒Phospho-NDRG1 (Ser330) 酸化分化相關基因NDRG1100 ul
6-羥多巴(6-OHDA)ELISA試劑盒Phospho-NDRG1 (Thr346) 酸化分化相關基因NDRG120 ul
60S核糖體蛋白L36a-樣(RPL36AL)ELISA試劑盒NDRG2 抑癌基因NDRG2100 ul
60S核糖體蛋白L17(RPL17)ELISA試劑盒NDRG3 抑癌基因NDRG3100 ul
蟹特定基因序列PCR檢測試劑盒價格人黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒英文名稱:Human mucosal addressin cell adhesion molecule-1,MAdCAM-1 ELISA Kit進口/原裝
人黏著斑激酶(FAK)ELISA試劑盒英文名稱:Human focal adhesion kinase,FAK ELISA Kit進口/原裝
人鳥氨酸氨基甲酰轉移酶(OCT)ELISA試劑盒英文名稱:Human ornithine carbamoyl transferase,OCT ELISA Kit進口/原裝
人鳥氨酸脫羧酶(ODC)ELISA試劑盒英文名稱:Human Ornithine decarboxylase,ODC ELISA Kit進口/原裝
人鳥苷酸交換因子(GEF)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Guanine Exchange Factor,GEF ELISA Kit*
人鳥苷酸結合蛋白4(Gbp4)ELISA試劑盒英文名稱:human guanylate nucleotide binding protein 4,Gbp4 ELISA Kit*小鼠維生素B12(VB12)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠維生素A(VA)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠病毒(MVM)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠網膜素(omein)ELISA試劑盒 組裝/原裝
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。