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多配體蛋白聚糖2100 ul膽固(CH)ELISA試劑盒HtrA2/Omi 線粒體絲氨酸蛋白酶100 ul單絲氨酸蛋白激酶1(LIMK1)ELISA試劑盒TRT/RT 端粒酶100 ul單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒human serum 血清100 ul單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒Human serum 血清10
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產品名稱 | 人白細胞抗原PCR檢測試劑盒規格 |
規格 | 50T |
貨號 | LZP7756 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
二偶氮碳酰肼(>60%(HPLC))SignalSilence® RIP3 siRNA II (Mouse Specific)N,N'-二甲脒
二甲基黃S6 Ribosomal Proin (54D2) Mouse mAb (HRP Conjuga)2-代-2-甲基丁烷
砷試劑,DDTC銀鹽TPP1 (D4E2R) Rabbit mAb甲基酸芐基酯
2,6-二溴酚靛酚鈉HSD17B6 (D1T5H) Rabbit mAb5-氮雜吲哚-2-甲酸
鉻黑TUCP1 (D9D6X) Rabbit mAb2-溴酰
鉻藍黑RANT2/SLC25A5 (E2B9D) Rabbit mAb2-酰
鉻藍IMP2 (D4R2F) Rabbit mAb5,7-二-羥基-2-(三氟甲基)喹啉
二四酸三鹽(EDTA-3K)STAM2 Antibody甲氧基
熒光素(IND)Sec24C (D9M4N) Rabbit mAb2-基-甲氧基吡
熒光素(AR,90%)Phospho-ALK (Tyr1507) (D6F1V) Rabbit mAb2-氟-6-(二氟甲氧基)吡啶
試亞鐵靈Mono-Methyl Lysine [mme-K] MultiMab™ Rabbit mAb mix2,6-二-三氟甲基吡啶
鈣紅,二縮雙(鄰氨基酚)Tri-Methyl Lysine Motif [tme-K] (D1L1X) Rabbit mAb5-溴-2-甲氧基-硝基砒啶
羥基萘酚藍Dinitrophenol (D1D6) Rabbit mAb庚酸酯
試劑Digoxigenin (D8Q9J) Rabbit mAb溴芐
二四酸鋅二鈉 四水合物Na Channel β1 Subunit (D9T5B) Rabbit mAb2,二-
石蕊MRP1/ABCC1 (D7O8N) Rabbit mAb2-溴-三氟酚
甲基橙(IND)Na Channel β2 Subunit (D1S8E) Rabbit mAb氨基-2,2-二甲基-1-
甲基紅鈉鹽(IND)Sec24D (D9M7L) Rabbit mAb溴-2-氟三氟甲
膽固酯轉移蛋白(CETP)ELISA試劑盒HSP105 熱休克蛋白105100 ul
膽固7α-羥化酶(CYP7A)ELISA試劑盒Syndecan-2 多配體蛋白聚糖2100 ul
膽固(CH)ELISA試劑盒HtrA2/Omi 線粒體絲氨酸蛋白酶100 ul
單絲氨酸蛋白激酶1(LIMK1)ELISA試劑盒TRT/RT 端粒酶100 ul
單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒human serum 血清100 ul
單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒Human serum 血清100 ul
單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒COX10 細胞色素c氧化酶10100 ul
單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒IAA (Indole-3-Acetic Acid) 吲哚酸/植物生長素100 ul
單純皰疹病毒抗原-1(HSV-Ag1)ELISA試劑盒IAA 吲哚酸/植物生長素100 ul
人白細胞抗原PCR檢測試劑盒規格G蛋白偶聯受體20抗體5-(2-Amipropyl)-7-cyaindolin-1-yl)propyl benzoate中文名:別名:分子式:C22H25N3O2
G蛋白偶聯受體21抗體3-(5-(2-Amipropyl)-7-cyaindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate中文名:別名:分子式:C26H31N3O8
G蛋白偶聯受體22抗體Agomelatine中文名:阿戈美拉汀別名:分子式:C15H172
G蛋白偶聯受體25抗體2-[2-(2,2,2-Trifluoroethoxy)phexy]ethyl methanesulfonate中文名:別名:分子式:C11H13F3O5S
G蛋白偶聯受體26抗體1-Indane中文名:別名:分子式:C9H8O