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流行性腮腺炎病毒PCR檢測試劑盒規格上海聯祖生物相關產品:糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒英文名稱:Human Hydroxyproline-Rich Glycoprotein,HRGP ELISA Kit*人橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒 英文名稱:Human desmogleins 1,DGS-E1 ELISA Kit*小鼠超敏C反應蛋白(hs-CR
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產品名稱 | 流行性腮腺炎病毒PCR檢測試劑盒規格 |
規格 | 50T |
貨號 | LZP7668 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
春雷霉素;春日霉素; 克死霉SSTR1 Antibody6-靛紅
土拉霉素A,托拉菌素A,泰拉霉素WBP2 Antibody靛紅
土拉霉素A(標準品)USP8 (D18F6) Rabbit mAb氨基丁縮二
拉氧頭孢鈉FGF Receptor 2 (D4H9) Rabbit mAb2-甲基-6-喹啉羧酸
原花青素Cell Fractionation Antibody Sampler Kit2-溴-5-甲氧基酚
原花青素(標準品)HA-Tag (C29F4) Rabbit mAb (Magnetic Bead Conjuga)肼鹽酸鹽
胡椒GST (26H1) Mouse mAb (Magnetic Bead Conjuga)鄰酰氨基對酚
胡椒(標準品)Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb (Magnetic Bead Conjuga)對
紐莫康定B0(肺囊康定) PAX5 (D19F8) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)甲基-2-酸酯
福莫特羅 p21 Waf1/Cip1 (12D1) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjuga)甲酸正戊酯
溴甲后馬托品Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb (Pacific Blue™ Conjuga)1-CBZ-哌啶酸
酸阿比特龍酯PhosphoPlus® EGFR (Tyr1068) Antibody Duet5-溴-8-硝基異喹啉
溴莫尼定 PSMA2 (D3A4) Rabbit mAb鄰三氟甲氧基
磺草靈Phospho-Bad (Ser112) (40A9) Rabbit mAb (PE Conjuga)羥基哌啶鹽酸鹽
磺草靈(標準品)NBC1/SLC4A4 AntibodyN-甲基對甲磺酰
磺酸貝托司汀Phospho-GIT2 (Tyr392) (D8N9A) Rabbit mAb2,6-二-
葉綠素銅鈉鹽Upf2 (D3B10) Rabbit mAb2-氟-5-
新綠原酸(標準品)UBE2S (D5H9H) Rabbit mAb鄰溴三氟甲氧基
DNA(胞嘧啶-5)甲基轉移酶3A(DNMT3A)ELISA試劑盒CSP 環子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)100 ul
DNA(胞嘧啶-5)甲基轉移酶1(DNMT1)ELISA試劑盒C-SKI/v-SKI C-SKI100 ul
DAB2互作蛋白(DAB2IP)ELISA試劑盒Calcitonin 降鈣素100 ul
C型鈉尿肽(CNP)ELISA試劑盒Calcitonin 降鈣素100 ul
C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒CTBP1 C端結合蛋白1100 ul
C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒CT DNA (calf thymus DNA) 小牛胸腺DNA 1 Kit
CXC趨化因子受體4(CXCR4)ELISA試劑盒CTGF 結締組織生長因子100 ul
CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒CD150/SLAM 信號淋巴細胞活化分子CD150100 ul
CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒CD151/MER2/PETA-3 CD151100 ul
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