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狂犬病毒PCR檢測試劑盒規格上海聯祖生物相關產品:細胞周期檢測點激酶2100 ul白介素4(IL-4)ELISA試劑盒Phospho-CHK2 (Thr68) 酸化細胞周期檢測點激酶2300 ul白介素35(IL-35)ELISA試劑盒Chloramphenicol 霉素
產品分類
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產品名稱 | 狂犬病毒PCR檢測試劑盒規格 |
規格 | 50T |
貨號 | LZP7652 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
天青石藍C10H18O對己基聯甲酸
天青 B 曙紅C15H14O41-吲哚酸酯
利馬前列素C28H31NO8化二基鋁
天青II曙紅C28H29NO7(1-重氮-2-氧代基)膦酸二甲酯
菲律賓菌素;非律平;FilipinC36H36N2O8(3AR,7AS)-REL-八氫-1H-異吲哚鹽酸鹽
瑞舒伐他汀/羅蘇伐他汀游離酸C20H18O82-溴-
蘇丹I/溶劑黃14C20H20N2O3δ-十三烷酸內酯
蘇丹II/蘇丹2/溶劑橙7C20H20N2O42,3,4,5,6-五氟甲酮
蘇丹Ⅲ/蘇丹紅III/溶劑紅23C20H20N2O4N基-N(2-羥基)-2-甲基-1,二硫酸鹽
蘇丹Ⅳ/蘇丹紅4/溶劑紅24C30H50O2四(甲硫代)四硫富瓦
油紅O/溶劑紅27/蘇丹紅5BC30H48O2鹽酸雷尼替丁
蘇丹紅G/溶劑紅1/油紅113C15H22O2酮基膦酸二甲酯
蘇丹/溶劑黑3C15H22O21,雙[2-(羥基)-2-基]
蘇丹紅BC16H16O5依匹斯汀鹽酸鹽
蘇丹紅7B/溶劑紅19/脂肪紅7BC8H10O3氧基
蘇丹藍II/溶劑藍35C9H12O3氨基磺酸
吖啶橙/性橙14C11H12O5METHYL GUAIAZULENE-CARBOXYLA
甲基紅C8H8O4METHOXYCARBONYL-5-NITROPHENYLBORONIC ACID, PINACOL ESR
白介素6(IL-6)ELISA試劑盒CHK1 細胞周期檢測點激酶1100 ul
白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒CHK2 細胞周期檢測點激酶2100 ul
白介素4(IL-4)ELISA試劑盒Phospho-CHK2 (Thr68) 酸化細胞周期檢測點激酶2300 ul
白介素35(IL-35)ELISA試劑盒Chloramphenicol 霉素100 ul
白介素33(IL-33)ELISA試劑盒Gentamicin 慶大霉素300 units
白介素31(IL-31)ELISA試劑盒tracycline 四環素100 ul
白介素3(IL-3)ELISA試劑盒Gentamicin Monoclonal Antibody 慶大霉素1 Kit
白介素2受體β(IL2rb/CD122)ELISA試劑盒Oxytracycline 土霉素100 ul
白介素2可溶性受體α鏈(sIL-2Rα/CD25)ELISA試劑盒Metronidazole 甲硝唑1 Kit
狂犬病毒PCR檢測試劑盒規格兔主動脈平滑肌細胞5 x 10^5 cells/T25培養瓶
兔主動脈外膜成纖維細胞5 x 10^5 cells/T25培養瓶
兔內膜上皮細胞5 x 10^5 cells/T25培養瓶
兔平滑肌細胞5 x 10^5 cells/T25培養瓶
小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞5 x 10^5 cells/T25培養瓶
小鼠B淋巴細胞5 x 10^5 cells/T25培養瓶