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口蹄疫病毒PCR檢測試劑盒價格上海聯祖生物相關產品:-四甲基聯雙酚二縮水甘油羅丹明6G/性紅1/玫瑰紅6GC13H10O3甲-N,N-二甲基腙麗絲羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產品名稱 | 口蹄疫病毒基因分型PCR檢測試劑盒廠家 |
規格 | 50T |
貨號 | LZP7650 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
孟魯司特鈉C26H29O16Cl2--6-氟
孟魯司特鈉(標準品)C26H29ClO151-基-(反-基環己基)
β-葡聚糖酶C16H22O4基酸
2-脫氧-L-胸苷/替比夫定C54H92O24四丁基化銨(水合物)
替比夫定(標準品)C54H92O24溴-5-甲
輪環藤寧/1,4,7,10- 四氮雜環十二烷 C48H82O192-溴喹喔啉
雷替曲塞C48H82O19(S)-(-)-1-(甲氧基)
L-鳥氨酸 L-天門冬氨酸鹽C30H46O3辛酸戊酯
雙嘧達莫C29H44O6氨基-7H-吡咯并[2,D]嘧啶硫酸鹽
他米巴羅汀C42H72O147-氧代-7-氮雜吲哚
文多靈C30H44O71-(2-吡啶)哌啶單鹽酸鹽
羅丹明B;玫瑰紅BC19H28O3基-氟酸
頭孢哌酮;頭孢哌酮酸C12H14O46-
頭孢哌酮(標準品)C16H22O111-溴-2,4,5-三
異硫酸羅丹明BC10H10O43,3'5,5'-四甲基聯雙酚二縮水甘油
羅丹明6G/性紅1/玫瑰紅6GC13H10O3甲-N,N-二甲基腙
麗絲羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B C30H48O5FMOC-D-氨酸
麗絲羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B C30H48O41-Boc-哌
酮酸激酶(PK)ELISA試劑盒CEA 癌胚抗原(檢測)100 ul
二酰輔酶A脫羧酶,線粒體(MLYCD)ELISA試劑盒CEAcam8/CD67 癌胚抗原相關細胞粘附分子8100 ul
二酸單酰輔酶A(malonyl CoA) ELISA試劑盒cellulase 纖維素酶100 ul
二(MDA)ELISA試劑盒CEBP-alpha 轉錄調節因子C/EBP α 100 ul
氨酸轉氨酶/谷轉氨酶(ALT/GPT)ELISA試劑盒Phospho-CEBP alpha (Ser21) 酸化轉錄調節因子CEBP α 20 ul
表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒Phospho-CEBP alpha (Thr222/226) 酸化轉錄調節因子CEBP α 100 ul
表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒CEBP Beta 轉錄調節因子C/EBP β100 ul
氨酸(LPA)ELISA試劑盒Phospho-CEBP beta (Ser105) 酸化轉錄調節因子CEBP β1 mg
胞外超氧化物歧化酶[Cu-Zn](SOD3)ELISA試劑盒Phospho-CEBP beta (Thr235) 酸化轉錄調節因子CEBP β1 Kit
口蹄疫病毒基因分型PCR檢測試劑盒廠家腎損傷分子1抗體(甲型肝炎病毒細胞受體1)Gentiopicroside中文名:龍膽苦苷別名:Gentiopicrin分子式:C16H20O9
SEC63域內含蛋白1抗體Theviridoside中文名:黃夾環烯醚萜苷別名:分子式:C17H24O11
類狀瘤病毒33 E6蛋白抗體Feretoside中文名:雞矢藤次苷甲酯別名:Scandoside methyl ester分子式:C17H24O11
19號染色體開放閱讀框38抗體Mussaeside中文名:別名:分子式:C17H26O10
肺癌相關蛋白8抗體Secoxyloganin中文名:別名:分子式:C17H24O11