Product Center
副流感病毒Ⅰ型PCR檢測試劑盒價格上海聯(lián)祖生物相關產品:OSMR檢測試劑盒將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
產品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關文章
RELATED ARTICLES組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
?
產品名稱 | 副流感病毒Ⅰ型PCR檢測試劑盒價格 |
規(guī)格 | 50T |
貨號 | LZP7581 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
西地尼布C23H28O11(R)-(-)-芐氧甲基環(huán)氧烷
塞來昔布,塞內昔布,賽利克西C5H11NO22-硝基亞氨基咪唑烷
塞來昔布,塞內昔布(標準品)C13H18O72-代-2-甲基丁烷
丁酸氮芥C12H16O71,2-雙(*基硅氧基)烷
鹽酸金霉素,鹽酸四環(huán)素C9H6O2基三丁酮肟基硅烷
鹽酸金霉素(標準品)C21H25,1-二基己烷
西洛他唑C33H40O152,2-雙(氧基)烷
西洛他唑(標準品)C16H12O61-芐氧羰基-羥基氮雜環(huán)丁烷
順鉑(進分)C27H32O14正十二烷基*氧基硅烷
順鉑C30H26O13(R)-2-BOC-氨甲基吡咯烷
順鉑(標準品)C30H26O12*硅烷基
西酞普蘭C19H23NO4·HCl三基硅烷
西酞普蘭(標準品)C20H18NO4Cl三(甲基)
克拉曲濱,克拉利賓C19H14NO4基三(2-甲氧基氧基)硅烷
克拉霉素C24H28O11三(*代甲硅烷基)
克拉霉素(標準品)C25H30O13正三十三烷
克林霉素酸酯C22H18O11環(huán)氧基-7-氧雜二環(huán)[4,1,0]庚烷
克林霉素酸酯(標準品)C22H18O10順式-2,環(huán)氧丁烷
豬雌二受體(ER)ELISA試劑盒ABL2 ABL2蛋白100 ug
豬雌二(E2)ELISA試劑盒ABI1 ABI1/SSH3BP1蛋白100 ul
豬成纖維細胞生長因子19(FGF19)ELISA試劑盒ABP 雄激素結合蛋白100 ug
豬腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒Adenylyl cyclase/AC 腺苷酸環(huán)化酶100 ug
豬腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒ACE1 血管緊張素轉換酶ACE1100 ug
豬補體因子H(CFH)ELISA試劑盒ACA11 擬南芥ACA11100 ug
豬補體片斷5b(C5b)ELISA試劑盒AHA3 AHA3(擬南芥)100 ug
豬補體片斷5a(C5a)ELISA試劑盒ACE2 ACE2100 ug
豬補體蛋白4(C4)ELISA試劑盒ACEI 血管緊張素1轉換酶抑制劑100 ug
副流感病毒Ⅰ型PCR檢測試劑盒價格卵黃狀黃斑病蛋白4抗體Garbanzol中文名:鷹嘴豆醇別名:分子式:C15H12O5
卵黃狀黃斑病蛋白3抗體Apigenin 4'-O-rhamside中文名:芹菜素-4'-O-鼠李糖苷別名:分子式:C21H20O9
BEND2蛋白抗體3,4,4',7-Tetrahydroxyflavan中文名:別名:3-Epiguibourtacacidin分子式:C15H14O5
晶狀體蛋白2抗體Isoastilbin中文名:異落新婦苷別名:分子式:C21H22O11
7號染色體開放閱讀框27抗體Vestitol中文名:別名:(-)-Vestitol分子式:C16H16O4