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猴免疫缺陷病毒PCR檢測試劑盒規格上海聯祖生物相關產品:Enterovirus檢測試劑盒有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質的量的能力;2)為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。
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產品名稱 | 猴免疫缺陷病毒PCR檢測試劑盒規格 |
英文名稱 | Simian Immunodeficiency Virus(SIV)RTPCR |
貨號 | LZP7300 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
SalirepinBOC-L-環基氨酸 BR野百合堿 95%
SesamolBOC-D-環基氨酸 BR千金藤素 分析標準品,≥98%(HPLC)
Shegansu BBOC-L-高苯氨酸 BR白屈菜紅堿 分析標準品,>98%
Sideroxylonal ABOC-D-高苯氨酸 BR班蝥素 分析標準品,≥98%
(+)-S-Myrical glucosideBOC-D-絲氨酸甲酯 98%莪術 分析標準品,≥98%
Stilbostemin BDL-半胱氨酸鹽酸鹽,一 98%刺五加皂苷B 分析標準品,≥98%
Stilbostemin NDL-胱氨酸鹽酸鹽 98%告達亭甙元 分析標準品,≥98%
Syringic acidDL-胱氨酸 98%斷血流皂苷A 分析標準品,≥98%
SyringolL-瓜氨酸 98%鼠尾草酸 分析標準品,≥92%
Tachioside羧鈉 USP級黃楊堿 分析標準品,≥99%
Tannic acidD-環基氨酸 BR二氫楊梅素 分析標準品,≥98%
TaxiphyllinL-環基氨酸 BR去甲斑蝥素 分析標準品,≥98%
TecominDL-環基氨酸 BR6,7-二羥基 分析標準品,≥98%
Terchebulin3,5-二-L-酪氨酸 BR薯蕷皂甙 分析標準品,≥98%
TetrahydrocurcuminFmoc-L-纈氨酸 98%大黃素 分析標準品,≥96.0% (HPLC)
TetramethylcurcuminFmoc-L-亮氨酸 98%表兒茶素 分析標準品,≥98%
酸性品紅6B(>50%,BS)n-phospho-Src (Tyr416) (7G9) Mouse mAbPhospho-Jak3 (Tyr980/981) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體
吖啶鹽酸鹽(>98%,BS)eIF2α (L57A5) Mouse mAbPhospho-Jak3 (Tyr785) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體
1-金剛烷甲酸(>99%,BR)Grp94 Antibodyphospho-JAK2(Tyr221) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗體
B1(>98%,BR)Grp94 Antibodyphospho-JAK2(Tyr1007+Tyr1008) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗體
B2(>98%,BR)Phospho-Src (Tyr527) AntibodyPhospho-Jak1 (Tyr1022/1023) 磷酸化蛋白質酪氨酸激酶JAK-1抗體
G1(>98%,BR)Phospho-Src (Tyr527) Antibodyphospho-ITGB4(Tyr1530) 磷酸化整合素β4抗體
G2(>98%,BR)Hexokinase II Antibodyphospho-ITGB4(Tyr1526) 磷酸化整合素β4抗體
茜素黃R鈉鹽n-phospho-Src (Tyr527) Antibodyphospho-ITGB4(Tyr1494) 磷酸化整合素β4抗體
D-阿洛糖(>98%,BR)n-phospho-Src (Tyr527) Antibodyphospho-ITGB3(Tyr785) 磷酸化整合素β3抗體
α-葡萄糖縮氯(>98%,BR)Src Antibodyphospho-ITGB3(Tyr773) 磷酸化整合素β3抗體
猴免疫缺陷病毒PCR檢測試劑盒規格小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:25克
小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:100克
小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:2~8℃5克
小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT25克
小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:100克
小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:500克
小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT1克
小鼠絨毛膜促性腺激素(CG)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:25克
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。