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哈達爾沙門氏菌PCR檢測試劑盒價格上海聯祖生物相關產品:ADRA1A檢測試劑盒自備物品:1 、產品名稱37 ℃ 恒溫箱2 、標準規格酶標儀3 、精密移液器及一次性吸頭4 、蒸餾水5 、一次性試管6 、吸水紙
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產品名稱 | 哈達爾沙門氏菌PCR檢測試劑盒價格 |
英文名稱 | Salmonella hadarPCR |
貨號 | LZP7257 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
13(18)-Oleanen-3-ol2,2'-二萘胺 98%石英砂 AR,6-10目,2-3mm
13(18)-Oleanen-3-one3-二甲基氨基-1- 99%石英砂 AR,8-16目或1-2mm
14,17-Epidioxy-28-r-15-taraxerene-2,3-diol4-甲基二苯胺 98%2-氨基吡啶 CP
15-Deoxoeucosterol3-甲基二苯胺 98%甲酯 99%
16-O-Acetylpolyporenic acid C4-甲氧基-4'-甲基二苯胺 98%氨基黑10B AR
16-Oxoalisol A4-甲氧基二苯胺 98%石杉堿甲 99%
20,24-Dihydroxydammar-25-en-3-one甲基烯酸酐 94%蛻皮激素 分析標準品,≥95% (HPLC)
20,24-Epoxy-24-methoxy-23(24-25)abeo-dammaran-3-one4-硝基三苯胺 98%蛻皮激素 ≥93% (HPLC), 粉末
20(29)-Lupene-3,23-diol三(4-基)胺 97%蛻皮激素 ≥95% (HPLC), 粉末
20-Hydroxy-3-oxo-28-lupaic acid三(4-苯)胺 98%芍藥苷 分析標準品,≥98%
20R-Ginseside Rg2三(4-甲酰苯基)胺 97%芍藥苷 ≥98% (HPLC)
(20R)-Ginseside Rh1N,N,N,N-四苯基聯苯胺 98%仲丁 standard for GC, ≥99.8% (GC)
20(R)-Ginseside Rg31 3 5-三((3-基)苯基氨基]苯 97%仲丁 99.5%,無級
20S,24R-Epoxydammar-12,25-diol-3-one4,4',4''-*基三苯胺 98%仲丁 99%
20(R)-Ginseside Rh21,3,5-三(N,N-二苯基氨基)苯 97%仲丁 CP,99%
(20S)-Protopanaxatriol三苯胺 98%仲丁 分析標準品,≥99.9% (GC)
氫氧化鈣(>95%,BR)Phospho-Skp2 (Ser64) AntibodyPhospho-Rb(Thr826) 磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體
低粘度羥基纖維素CDC20 (D6C2Q) Rabbit mAbPhospho-Rb(Ser795) 磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體
L(+)二鈉二(>98%,BC )Sec61A1 (D4K2Z) Rabbit mAbPhospho-Rb(Ser788) 磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體
亞硝酸(>96%,BR)Sec61A1 (D7Q6V) Rabbit mAbPhospho-Rb(Ser612) 磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體
鹽酸吡哆胺(>98%,BC )MLLT1/ENL (D9M4B) Rabbit mAbphospho-Rb(Ser249) 視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體
楊酸鈉(>99%,USP)COBRA1 (D6K9A) Rabbit mAbPhospho-Rb (Thr821) 磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體
3-(環己氨基 )-1-磺酸鈉(分子生物學級)BCL6 (D4I2V) XP® Rabbit mAbPhospho-Rb (Ser807/Ser811) 磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體
血紅素(>95%,BR)BCL6 (D4I2V) XP® Rabbit mAbPhospho-Rb (Ser608) 磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體
聚乙二800MIST1/bHLHa15 (D7N4B) XP® Rabbit mAbPhospho-RASGRF1(Ser929) 磷酸化Ras特異性鳥嘌呤核苷酸釋放因子1
炔雌;炔雌環戊MIST1/bHLHa15 (D7N4B) XP® Rabbit mAbPhospho-RasGRF1(Ser916) 磷酸化Ras特異性鳥嘌呤核苷酸釋放因子1
哈達爾沙門氏菌PCR檢測試劑盒價格小鼠17羥孕(17-OHP)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT1克
小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT1克
小鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:1米
小鼠5羥色(5-HT)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:25克
小鼠6前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:
小鼠6前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:2~8℃,避光1克
小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:10張/盒
小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:1公斤
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。