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都柏林沙門氏菌PCR檢測試劑盒規格上海聯祖生物相關產品:LP Ab-IgG檢測試劑盒恒溫箱系列可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器。 干凈的試管和 Eppendof 管。
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 都柏林沙門氏菌PCR檢測試劑盒規格 |
英文名稱 | Salmonella dublinPCR |
貨號 | LZP7252 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
2’,3’-DehydrosalanlD-氨酸 98%肼黃 85%
2,3-Dihydroxy-12-oleanen-28-oic acidD-天冬酰胺,一 99%柯衣定 AR
2,3-Di-O-methylthiomethyleuscaphic acidD-谷氨酸 98%香紫蘇內酯 97%
2,3-O-Isopropylidenyl euscaphic acidD-哌啶酸 99%S-聯萘酚 99%
2,24-Dihydroxyursolic acidL-高脯氨酸 98%雙(二苯基膦) 98%
2-Epitormentic acidD-脯氨酸 99%1,2-雙(二苯基膦)乙烷 98%
2alpha-hydroxy-3beta-acetyloxy-betulic acidD-纈氨酸 98%1,1'-雙(二-叔丁基膦基)二茂鐵 98%
2’’-O-acetyl-platyconic acid A對溴苯酚 98%1,5-雙(二苯基膦)戊烷 97%
2-Oxopomolic acid對溴苯酚 分析標準品1,6-雙(二苯基膦基)己烷 97%
2-Picenecarboxylic acid溴乙 97%1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵 97%
3,4-Secocucurbita-4,24-diene-3,26,29-trioic acidN-溴代丁二酰亞胺 AR,99.00%雙(三苯基膦)氯化銨 96%
3,4-Secotirucalla-4(28,7,24-triene-3),26-dioic acidN-溴代丁二酰亞胺 CP,98.5%1,4-雙(二苯膦基)丁烷 96%
3,6,19,23-Tetrahydroxy-12-ursen-28-oic acid3,5-二氯-2-羥基苯磺酸鈉 99%(R)-(+)-2,2'-雙(二苯膦基)-1,1'-聯萘 98%
3,6,19-Trihydroxy-23-oxo-12-ursen-28-oic acidN-羥基琥珀酰亞胺 98%R-1,1'-聯-2-萘酚 99%
3,19-Dihydroxy-6,23-dioxo-12-ursen-28-oic acidN-代丁二酰亞胺 97%(S)-(-)-2,2'-雙(二苯膦基)-1,1'-聯萘 98%
3,21-Dihydroxy-14-serraten-16-one喹啉 AR,96%1,3-雙(二苯膦基)烷 97%
磷酸二氫鈉一(ACS級)MKL1/MRTF-A AntibodyPhospho-SEK1/MKK4 (Ser257) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體
葡萄糖酸鈣PRMT7 (D1K6R) Rabbit mAbphospho-SCNN1B(Thr615) 磷酸化上皮鈉通道β2抗體
乙二胺四乙酸四鈉鹽二LARP1 Antibodyphospho-SCNN1B(Ser633) 磷酸化上皮鈉通道β2抗體
十二烷基-β-D-麥芽糖苷;月桂酰基麥芽糖苷Vti1a (D8U3M) Rabbit mAbPhospho-SATB1 (Ser47) 磷酸化核基質結合區結合蛋白1抗體
鹽酸氨基脲Phospho-Mcl-1 (Thr163) (D5M9D) Rabbit mAbPhospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) 磷酸化S6核糖體蛋白抗體
硫酸鏈霉素滅菌溶液,30 mg/mlxa (D8L7U) Rabbit mAbPhospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235+Ser236) 磷酸化S6核糖體蛋白抗體
乙酰胺XPC (D1M5Y) Rabbit mAbphospho-RUNX3(Ser338) 磷酸化Runx3抗體
1,3-雙(三羥甲基)甲基氨基烷IFIT1 (D2X9Z) Rabbit mAbphospho-RUNX2(Ser451) 磷酸化成骨特異性轉錄因子抗體
萘乙酰胺(AR)Phospho-SLP-76 (Tyr145) Antibodyphospho-RUNX1(Ser266) 磷酸化急性髓細胞白血病1蛋白抗體
氫氧化鋇八CEACAM1 (D1P4T) Rabbit mAbphosphor-SMAD2(Ser425) 磷酸化細胞信號轉導分子SMAD2抗體
都柏林沙門氏菌PCR檢測試劑盒規格鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:5克
鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:2~8℃5克
鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:2~8℃150毫升
鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:2~8℃150毫升
鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:2~8℃150毫升
鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:100毫克
鼠白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:100克
鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT25克