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產品名稱 | 狂犬病病毒固定毒株PCR檢測試劑盒價格 |
英文名稱 | Rabies Virus(RV、fixed virus)RTPCR |
貨號 | LZP7209 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
Lead銀 99.9%,≤0.5μm鹽酸黃連堿 分析標準品,≥98%
Lead質銀標樣 分析標準品野百合堿 95%
Lead銀 99.5%,60-120nm甘草苷 分析標準品,>99.5%
Lead acetate trihydrate銀粉 99.99% metals basis,≤0.1μm莨菪亭 98%
Lead oxide red異辛胺 99%3-氯-1,2-(消旋體) 99%()
Lead oxide yellow庚胺 98%碳酸氫銨 99.995% metals basis
Lead(II)borate異丁胺 99%環己胺 Standard for GC,>99.5%(GC)
Lead(II)carbonate辛胺 99%環已胺 CP,98%
Lead chromate三辛胺 90%環己胺 >99.0%(GC)
Lead hydroxide三辛胺 離子對試劑環己胺 ≥99.5% (GC)
Lead(II)iodide三辛胺 98%甜蜜素 99%
Lead(IV)acetate三異辛胺 98%苯乙 95%
Lead(II)acetate basic6-氨基-1-己 97%苯乙 50%溶液
Lead(II)stearate烯基*基硅烷 98%溴乙 97%
Lithium bromide dihydrate丁炔二酸 98%二氟 98%
Lithium Carbonate4-溴-2-氟苯 99%氯乙 98%
硝呋酚酰肼;硝呋奇特(標準品)Phospho-Rpb1 CTD (Ser7) (E2B6W) Rabbit mAbPSGL-1/CD162 P選擇素糖蛋白配體1抗體
酸酮,酸素UFD1 AntibodyPSGD/HOXB13 同源盒蛋白HOXB13抗體
千金藤素CDCP1 (D1W9N) Rabbit mAbPSF2 PSF2蛋白抗體
千金藤素(標準品)IL-6 (D5W4V) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific) (PE Conjugate)P-selectin/CD62p P選擇素抗體
醋酸卡泊芬凈Thy1/CD90 (D3V8A) Rabbit mAbPSD95 突觸后密度蛋白95抗體
小白菊內酯XAF1 (E1E4O) Rabbit mAbPSD93 突觸后密度蛋白93抗體
小白菊內酯Integrin α2b (D8V7H) Rabbit mAbPSCDBP/CYTIP 胞粘蛋白結合調節蛋白抗體
利扎曲坦PTPN14 (D5T6Y) Rabbit mAbPSCD1 細胞附著蛋白PSCD1抗體
地瑞那韋乙鹽P2X7 Receptor (E1E8T) Rabbit mAbPSCA 前列腺干細胞抗原抗體
維拉佐酮MyoD1 (D8G3) XP® Rabbit mAbPSAP/PAP 前列腺酸性磷酸酶抗體
狂犬病病毒固定毒株PCR檢測試劑盒價格人乙酰膽堿(ACH)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:100克
人乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:25克
人乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT25克
人乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:500克
人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:5克
人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:5克
人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:25克
人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBVpreS2Ab)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:100克
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。