Product Center
熱帶念珠菌PCR檢測試劑盒廠家上海聯祖生物相關產品:sCD30檢測試劑盒 Cyclin E 周期素E/原癌基因抗原Dnmt3a(cytosine-5)-methyltransferase 3A) DNA甲基轉移酶-3α(抗原)
產品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關文章
RELATED ARTICLES組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
?
產品名稱 | 熱帶念珠菌PCR檢測試劑盒廠家 |
英文名稱 | Candida tropicalisPCR |
貨號 | LZP6538 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
L-乳酸價格Anti-PDPK1 Antibody研究領域 細胞生物 細胞周期蛋白 細胞分化 細胞骨架
正磷酸〖鐵〗價格Anti-PDPN Antibody研究領域 免疫學 細胞膜受體
四乙酰核糖實驗步驟Anti-PDPN Antibody研究領域 激酶和磷酸酶
5-尿苷三磷酸三鈉鹽保存Anti-PDPN Antibody研究領域 腫瘤 免疫學 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節因子
核糖核酸鈉鹽(酵母)使用說明書Anti-PDPN Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 轉錄調節因子 轉運蛋白
順式吲哚-3-丙烯酸保存Anti-PDPN Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 轉錄調節因子 轉運蛋白
5-碘-2-脫氧胞苷保存Anti-PDX1 Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 轉錄調節因子 轉運蛋白
小牛浸膏粉使用說明書Anti-PEBP1 Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學
去氧膽酸鈉保存Anti-PEBP1 Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 染色質和核信號 細胞類型標志物
N-羥基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亞胺實驗步驟Anti-PECAM1 Antibody研究領域 細胞生物 免疫學 信號轉導 干細胞 b-淋巴細胞
硫酸葡聚糖1g說明書Anti-PECAM1 Antibody研究領域 腫瘤 免疫學 信號轉導 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶
人皰疹病毒PCR檢測試劑盒說明書Anti-PECAM1 Antibody研究領域 細胞生物 免疫學 神經生物學 表觀遺傳學
雙歧桿菌PCR檢測試劑盒圖片Anti-PECAM1 Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 染色質和核信號 信號轉導 細胞凋亡 生長因子和激素 轉錄調節因子
人磷酸酰肌醇蛋白多糖-3Elisa Kit多少錢Anti-PECAM1 Antibody研究領域 細胞生物 細胞周期蛋白 轉錄調節因子 細胞分化 表觀遺傳學
人乳酸脫氫酶Elisa Kit多少錢Anti-PECAM1 Antibody研究領域 腫瘤 細胞表面分子 腫瘤細胞生物標志物
硫清酸銨Ammonium ThiocyanateAR500g
0106-25GL-Alanine L-丙安酸56-41-725g83
NE474-1GNystatin (Mycostatin) 制霉菌素1400-61-91g
SDS-PAGE分離膠緩沖液(4X)100ml
N-Dodecylglucopyraside
肉豆蔻酸Myristic acid色標5g
ER0481Hin6I (HinP1I)2000 units15
C9754-1GColchicine 秋仙堿 (秋仙素)64-86-81g
D-Fructose-6-Phosphate, Diwo7ium Salt10g
L-天冬堿(+4℃)L-AsparaginepR10g
大鼠胰島素原(PI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人鋅α2糖蛋白(AZGP1)免疫試劑盒 Human AZGP1 ELISA kit
脂肪酸合成酶(FAS)測試盒 紫外分光光度法 25管/24樣
RatmammarycarcimaMarker-CA153ELISA試劑盒大鼠癌標志物-CA153ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISA試劑盒人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanLinkerforactivatiofTcell,LATELISAKit人T細胞活化連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒規格:96T/48T
熱帶念珠菌PCR檢測試劑盒廠家人胰腺癌細胞,Capan-1細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶
人胰腺癌細胞,Capan-2細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶
人胰腺癌細胞,CFPAC-1細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶
人胰腺癌細胞,HPAC細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶
人胰腺癌細胞,JF-305細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶
人胰腺癌細胞,MIA-PACA-2細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶